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  • 徐鸿雁, 孟清, 李艳艳, 刘菲燕, 李松龄, 张洋, 王亚艺
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    以杂木屑为对照,探究柠条木屑添加量对香菇(Lentinula edodes)生长发育和营养成分的影响规律,通过加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)挖掘香菇不同生长期相关的功能基因,筛选出木质纤维素降解核心基因,为深入解析香菇降解柠条基质的分子机制提供参考。结果表明:N3(30%柠条木屑)组香菇的产量最高,每棒为70.62 g,比对照组高41.2%;N3组的子实体蛋白和灰分含量最高,N2(20%柠条木屑)组子实体中脂肪含量最低,N1(10%柠条木屑)组子实体总氨基酸含量最高;找到5个与香菇生长密切相关的基因模块,其中Red模块(1 257个基因)与褐变期正相关,Brown模块(1 543个基因)与褐变期负相关,Greenyellow(136个基因)和Blue模块(2 062个基因)与子实体期正相关,Turquoise模块(6 132个基因)与子实体期负相关。功能基因富集分析发现:褐变期丙酮酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、柠檬酸循环等代谢途径显著富集;子实体期淀粉和蔗糖代谢、青霉素和头孢菌素生物合成、其他聚糖降解等代谢途径显著富集。选出2个可能与木质纤维素降解相关的基因CYP450和GH,以及ACPT、2-NPD、PTP1B、HLYD、VPS14C、MetE等18个可能与香菇生长发育密切相关的基因。研究结果可为深入解析香菇木质纤维素降解分子机制提供参考。
  • 孙仪, 李峰, 周怡, 李子豪, 李维航, 张丽娟, 邹亚杰
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    以草菇(Volvariella volvacea)菌株V34为材料,对海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)基因VvTPS进行克隆鉴定和生物信息学分析,探究不同温度(20、25、30、35、40 ℃)对VvTPS表达及VvTPS活性的影响。结果表明:草菇有两个VvTPS(VvTPS1和VvTPS2),分别编码882和1 018个氨基酸,启动子区包含多种激素和逆境响应的顺式作用元件;两个蛋白均定位于细胞质,具有典型的HAD保守结构域;在实验范围内,VvTPS1和VvTPS2表达量在20 ℃时最高,在40 ℃时较高,在35 ℃时最低;VvTPS活性在25 ℃最高,在35 ℃时最低。研究结果可为草菇抗逆育种提供参考。
  • 付亚娟, 张慧敏, 庞盈, 乔洁, 侯晓强
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    采用RT-PCR克隆梯棱羊肚菌(Morchella importuna)谷氨酸脱氢酶(MiGDH)基因,并进行生物信息学分析,采用DNA重组技术构建原核表达载体pEB-MiGDH,并在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中进行诱导表达。结果表明:MiGDH的cDNA序列长度为1 377 bp,编码458个氨基酸;MiGDH基因组DNA全长为1 529 bp,包含3个外显子和2个内含子;MiGDH相对分子质量为50 167.51,理论等电点为5.91,为稳定的亲水性蛋白质,不含信号肽,无跨膜结构域,定位于细胞质;MiGDH N端含有ELFV脱氢酶结构域,为NADP(H)-GDH;MiGDH的二级结构主要包括α螺旋和无规则卷曲,三级结构为同源六聚体;成功在原核表达系统中表达了MiGDH。本研究结果可为探讨MiGDH的生物学功能提供参考。
  • 王倩, 肖婷婷, 张宇辰, 张津京, 刘元剑, 王纵龙, 仇阳阳, 陈辉
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    以100%国产草炭覆土为对照(CK),分别用40%椰糠和40%进口草炭替代国产草炭,得到含水量分别为64.3%、71.2%和79.4%的3种覆土材料,研究不同覆土材料对双孢蘑菇(Agaricus bisporus)产量、品质及采后保鲜的影响。结果表明:3个处理的双孢蘑菇总产量无显著差异。处理A(40%椰糠和60%国产草炭)的外观品质与CK无显著差异,营养成分与CK差异较小;第一潮菇海藻糖、总糖、维生素C含量处理A显著高于CK;第二潮菇蛋白质、总糖含量处理A显著低于CK,但海藻糖和维生素C含量处理A显著高于CK;其他含量处理A与CK无显著差异。处理A的效果优于处理B(40%进口草炭和60%国产草炭)。此外,处理A的双孢蘑菇在贮藏过程中能较好保持采后品质。研究结果可为双孢蘑菇覆土的科学选择提供参考。
  • 姚英杰, 康霞, 赵怡, 王立安, 李守勉, 李国杰
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    自河北省承德市围场县塞罕坝采集木蹄层孔菌(Fomes fomentarius)野生子实体,组织分离获得菌株后进行鉴定,采用单因素实验和正交实验研究菌株的生物学特性,并驯化。结果表明:最适碳源、氮源、温度、pH分别为果糖、酵母浸粉、28 ℃、7,正交实验确定的最佳组合是果糖、酵母浸粉、28 ℃、pH6;菌丝50~55 d长满栽培袋,40~45 d后形成半球形原基,25~35 d后可采收,子实体直径4.5~6.4 cm、基部厚2.5~3.0 mm。研究结果可为木蹄层孔菌开发利用提供参考。
  • 王鑫, 包海鹰, 张广杰, 李玉
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    自枣树寄生粗毛纤孔菌(Inonotus hispidus)子实体组织分离获得菌株,采用三种培养基质(ZI1、ZI2、ZI3)栽培,测定6-(3,4-二羟基苯乙烯)-4-羟基-2-芘酮(hispidin)含量,并采用高效液相法测定子实体的指纹图谱。结果表明:最佳培养基质为ZI2(64%枣树木屑、16%棉籽壳、19%麦麸、1%生石灰),接种80~100 d后菌丝长满菌包,15~20 d后采收,出菇率为85%,产量为(12.87±1.53)g(干重);采用培养基质ZI2栽培子实体的Hispidin含量最高,为(141.70±1.20)μg·g-1;野生和3种培养基质栽培子实体的高效液相指纹图谱有8个共有峰(参照峰为Hispidin),相似度均大于0.99。
  • 章文深, 冯彩玲, 林智, 邱春锦, 吴岩斌, 吴建国
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    为探究广叶绣球菌(Sparassis latifolia)蛋白抗结肠癌活性及潜在作用机制,采用氯化钠浸提结合硫酸铵沉淀法制备广叶绣球菌蛋白(SLSP-50)。用高效液相色谱串联质谱技术(HPLC-MS/MS)检测SLSP-50主要蛋白质肽段的氨基酸序列,与广叶绣球菌的蛋白质氨基酸序列数据库进行比对,获取主要蛋白质的全氨基酸序列,再通过NCBI平台CD-search工具在线预测其保守结构域。用噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT)法检测SLSP-50体外对人结肠癌HT-29细胞增殖的抑制活性,用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole, DAPI)染色法、流式细胞术和免疫印迹法等检测SLSP-50对HT-29细胞凋亡的影响。结果显示:SLSP-50主要由A、B和C 3种蛋白质组成,蛋白质A为谷氨酸脱羧酶/酪氨酸脱羧酶/磷酸吡哆醛依赖酶,蛋白质B为S53家族蛋白/Pro-kumamolisin,蛋白质C未检索到相关功能域。SLSP-50能显著抑制HT-29细胞增殖,上调HT-29细胞促凋亡蛋白Bcl-2相关x蛋白(Bcl-2-associated x protein, Bax)、细胞色素C(cytochrome c, Cyt-c)、半胱天冬蛋白酶-3(cysteine-aspartic acid protease-3, Caspase-3)和cleaved-caspase-3的表达,下调抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2, Bcl-2)的表达,触发细胞线粒体凋亡,表明SLSP-50具有体外抗结直肠癌活性。研究结果可为广叶绣球菌蛋白作为一种潜在抗结肠癌药物的开发提供参考。
  • 王夕妹, 刘靖宇, 冯翠萍, 王元凤, 管骁, 刘朋, 杨焱
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    分别采用5种浓度(0.3、0.6、0.9、1.2、1.5 mol·L-1)NaCl提取猴头菌(Hericium erinaceus)糖蛋白(命名为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ),研究不同NaCl浓度对糖蛋白多糖含量、蛋白质含量、结构(蛋白质二级结构占比、单糖组成、氨基酸组成)差异以及体外抗氧化活性和免疫活性的影响,并分析NaCl浓度与其相关性。结果表明:5种猴头菌糖蛋白的多糖、蛋白质含量分别为5.55%~8.15%、 40.46%~75.96%,Ⅲ的多糖含量(8.15%)最高,Ⅱ的蛋白质含量(75.96%)最高;5种猴头菌糖蛋白均以β-折叠和无规则卷曲为主;就单糖组成而言,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ以葡萄糖和甘露糖为主,Ⅳ、Ⅴ均以葡萄糖和半乳糖为主。相较于Ⅳ和Ⅴ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ碱性氨基酸、酸性氨基酸和必需氨基酸含量较高。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对DPPH和ABTS清除自由基的能力高于Ⅳ和Ⅴ。五种猴头菌糖蛋白均能够刺激巨噬细胞RAW264.7释放NO、TNF-α和IL-6,相较于Ⅲ~Ⅴ,Ⅰ和Ⅱ具有更好的免疫刺激活性。NaCl浓度与蛋白质含量、氨基酸含量、α-螺旋比例、β-转角比例和总糖醛酸含量呈负相关,与多糖含量、β-折叠比例、无规则卷曲含量呈正相关。
  • 王志方, 代金平, 王小武, 杨新平, 冯杰, 刘艳芳, 张劲松
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    采用超高效液相色谱-串联飞行时间质谱联用(UHPLC-Q-TOF MS)代谢组学非靶向检测技术,比较野生新疆细虫草子实体(Ophiocordyceps gracilis)和菌丝体代谢物差异,并采用高效液相和高效阴离子色谱对其中的核苷、糖醇和小分子糖进行定量分析;采用化学荧光法对两者的水提物、醇提物的抗氧化活性进行比较。结果表明:从子实体和菌丝体中共鉴定出代谢物518种,主要包括有机酸及其衍生物、含氧有机物、脂质及类脂分子、有机杂合化合物、核苷、核苷酸及类似物、苯环型化合物、含氮有机物等化学类群;与子实体相比,菌丝体中含量显著上调的代谢物有49种,含量显著下调的代谢物有17种;差异代谢物主要富集的代谢途径包括ABC转运器、半乳糖代谢、突触囊泡循环、亚油酸代谢、味觉转导、谷胱甘肽代谢等;两者均含有6种核苷(胞苷、尿苷、肌苷、胸苷、腺苷、鸟苷)、3种糖醇(赤藓糖醇、阿拉伯糖醇、甘露醇)和4种小分子糖(葡萄糖、半乳糖、甘露糖、海藻糖),在菌丝体中,除赤藓糖醇含量低于子实体,甘露醇含量与子实体无显著差异外,其他成分的含量均高于子实体;与子实体相比,菌丝体水提物、醇提物对超氧阴离子、羟基自由基、过氧化氢的半数抑制浓度均较低。研究结果可为利用菌丝体替代野生新疆细虫草子实体提供参考。
  • 黄磊, 石鸿宇, 司灿, 何春梅, 刘勋成, 段俊
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    为探讨大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)不同发育时期菌盖和菌柄多糖的含量和抗氧化活性,采用水提醇沉法提取多糖,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用高效液相色谱法(HPLC)分析单糖组成及其在纽扣期、伸长期、半开伞期、全开伞期和衰亡期(编号为S1~S5)菌盖和菌柄的动态变化,并通过测定DPPH、羟自由基清除率,以及总还原力评价其抗氧化活性。结果表明:大球盖菇多糖含量在发育过程中先增加后降低,并于伸长期(S2)达到较高水平;菌柄中多糖的含量在各时期都显著高于菌盖,其中S2菌柄最高[(181.51 ± 11.23) mg·g-1],衰亡期(S5)菌盖最低[(63.04 ± 3.43) mg·g-1];单糖组成以葡萄糖为主,还含有甘露糖、半乳糖及阿拉伯糖;多糖的抗氧化活性呈浓度依赖性,且菌柄多糖活性普遍优于菌盖,其中S2菌柄的自由基清除能力最强。这些结果表明,菌柄是提取大球盖菇多糖的最佳材料,可为大球盖菇采收期确定和产品开发利用提供参考。
  • 樊明旭, 包海鹰, 宋超, 赵卉, 崔丽丽, 郭鸿莹, 赵天星, 图力古尔
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    为探究东北地区分布的台湾块菌(Tuber formosanum)子囊果在生长发育过程中香气成分变化规律,将台湾块菌分为未成熟、半成熟、近成熟和完全成熟4个阶段。使用顶空固相微萃取结合气相色谱串联质谱技术(HS-SPME-GC-MS)共鉴定出71种香气成分,其中醇类11种,醛类15种,酮类8种,酯类11种,烯烃类6种,芳香族9种,杂环类5种,烷烃类3种,醚类2种,卤代烃类1种。不同成熟度的台湾块菌香气成分差异显著且呈现一定规律性变化:醇类、醛类、酮类化合物随发育成熟含量逐渐降低,酯类在完全成熟阶段含量高(52.76%);通过变量投影重要性(variable importance in projection,VIP)筛选出13种差异成分,相对气味活度值(relative activity values,ROAV)分析表明2-乙基-1-己醇、己酸乙酯可作为成熟台湾块菌的标志化合物。
  • 陈佳悦, 梁月润, 肖江勇, 王尧, 贺媛, 徐丹, 张超, 钱正明
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    梳理冬虫夏草(Ophiocordyceps sinensis)化学成分和质量标准建设、药理和临床研究以及产业链状况、资源供给、产品应用现状,剖析产业发展制约因素,并提出构建“野生资源保育-生态繁育-道地产区抚育”的可持续利用体系、解析药效物质基础与作用机制、强化全产业链质量监管与溯源等产业发展策略建议,以期为推动冬虫夏草产业高质量发展提供参考。
  • 褚卓栋, 姜淑慧, 杨子涵, 桑青, 邓嘉琳, 陈文杰
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    硒是人体必需的微量元素,具有抗氧化、增强免疫力、抗肿瘤和抗感染等作用。硒生物强化是通过作物育种、基因工程或农艺实践增加农产品中的硒含量。食用菌不仅具有较强的硒富集能力,也具有较强的硒生物转化能力,能够有效地将无机硒转化为有机硒。笔者综述了食用菌硒生物强化途径、机制和技术要点,以及硒生物强化食用菌的功能,并展望了该领域的产业发展前景。