食用菌学报

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宋晓霞, 赵妍, 陈明杰, 尚晓冬, 谭琦, 宋春艳, 奚莉萍, 安应波

2019, 35(03): 1-10. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.001

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通过对50个香菇（Lentinula edodes）栽培菌株的β1微管蛋白部分基因进行测序、聚类和构建多态性图谱。结果表明：含有3条不同序列的菌株数为1，含有2条不同序列的菌株数为37，含有1条序列的菌株数为12；89条序列分为3个类型：Ⅰ型包括66条序列，Ⅱ型包括12条序列，Ⅲ型包括9条序列；根据对基因序列的分型，30个菌株属于Ⅰ型，11个菌株属于Ⅰ和Ⅱ型，5个菌株属于Ⅰ和Ⅲ型，1个菌株属于Ⅱ和Ⅲ型，1个菌株属于Ⅲ型；Cr02属于Ⅰ、Ⅲ和待定型，广香9号属于Ⅰ和待定型。

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热胁迫下糙皮侧耳实时荧光定量PCR内参基因的选择

侯志浩, 赵梦然, 陈强, 张妍, 黄晨阳, 邬向丽

2019, 35(03): 11-18. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.002

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在组成型表达基因和热胁迫转录组数据中选择12个基因作为热胁迫下糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）实时荧光定量PCR的候选基因。以40 ℃热处理0.5、1、3、6、12、24、48 h的糙皮侧耳菌丝体为材料，采用候选基因的特异性引物进行实时荧光定量PCR，运用geNorm、NormFinder和BestKeeper 3种软件对结果进行分析，评估12个候选基因的稳定性。结果显示〖WTBZ〗β〖WTB1〗微管蛋白基因、〖WTBZ〗β〖WTB1〗肌动蛋白基因和丝/苏氨酸蛋白磷酸酶基因可以作为糙皮侧耳热胁迫下理想的内参基因，而丝氨酸蛋白酶基因、磷酸化酶基因和细胞周期蛋白不适合作为糙皮侧耳热胁迫下的内参基因。

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梯棱羊肚菌凝集素MIL的外源表达及生物活性

舒芳, 刘伟, 张倩倩, 龚钰华, 边银丙

2019, 35(03): 19-25. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.003

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对梯棱羊肚菌（Morchella importuna）凝集素编码基因MIL及其编码蛋白进行生物信息学分析，并采用qRTPCR分析MIL基因在梯棱羊肚菌不同生长发育阶段（菌丝期、白色菌核期、黄色菌核期、原基期、幼菇期、成熟子囊果期）的表达量；构建pET28aMIL表达载体，在大肠杆菌（Escherichia coli）BL21中外源表达获得了凝集素蛋白MILHis，测定其生物活性。研究表明，梯棱羊肚菌MIL基因序列为426 bp，其中含有一个RicinB lectin保守结构域，与RicinBlike lectin同源性达95%；qRTPCR定量分析显示，在从菌丝到子囊果的生长发育过程中，梯棱羊肚菌MIL基因在白色菌核阶段的表达量最高，其次为黄色菌核阶段，幼菇、成熟子囊果和原基阶段次之，在菌丝阶段表达量最低，表明MIL基因可能在梯棱羊肚菌菌核形成中起到重要的调控作用；兔红细胞凝血实验结果显示重组蛋白MILHis凝集兔红细胞的最小浓度为0.32 mg/mL，同时发现MILHis具有提高小鼠脾脏淋巴细胞增殖率的活性，与对照相比增殖率达35.3%。

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采用ISSR和SRAP综合分析灰树花的遗传多样性

王艳, 万鲁长, 黄春燕, 韩建东, 李瑾, 杨鹏, 姚强, 宫志远, 谢红艳

2019, 35(03): 26-36. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.004

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通过菌丝拮抗实验观察灰树花（Grifola frondosa）菌株间拮抗反应及其类型和程度，采用简单序列重复区间（intersimple sequence repeat, ISSR）和序列相关扩增多态性（sequencerelated amplified polymorphism, SRAP）分子标记对灰树花基因组DNA进行PCR扩增，对42株灰树花的遗传多样性进行综合分析。结果表明：拮抗实验将42株灰树花分为17组；筛选出的14条ISSR和11对SRAP引物分别扩增出369条和219条清晰条带，多态性条带平均比率分别为84.01%和81.28%；ISSR和SRAP两种分子标记的综合聚类分析结果较单独分析更准确，当遗传相似系数为0.779时，可将42株灰树花划分为6大类群，表明本研究中选取的42株灰树花菌株的遗传多样性丰富，为杂交育种的亲本选择提供了分子水平的依据。

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灰盖鬼伞原基发育过程中的蛋白质组变化

MAJCHERCZYK Andrzej, DURNTE Bastian, SUBBA Shanta, ZOMORRODI Mojtaba, KUES Ursula

2019, 35(03): 37-50. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.005

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灰盖鬼伞在25 ℃以及12 h光照/12 h黑暗的环境下形成子实体。子实体最初在黑暗环境下通过大量生产菌丝分支形成初级菌丝结。光照信号触发初级菌丝结开始形成紧密的二级菌丝结。在随后原基发育的5 d中，菌盖和菌柄开始按照不同的光调控模式从这些菌丝结中分化，然后在第6天成熟。为了了解菌盖和菌柄组织形成时复杂的细胞过程，提取了原基各期的蛋白质组进行MS/MS质谱分析。结果显示，在不同的样本中检测到大约1672~2663个至少具有2个肽的蛋白，其中1401个蛋白是所有样本共有的，其中包含已知的涉及原基发育的蛋白。

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香菇自交选育新菌株及其亲本子实体的氨基酸特征及蛋白质营养价值

李巧珍, 刘建雨, 章炉军, 张美彦, 于海龙, 李玉, 周峰, 姜宁, 尚晓冬, 宋春艳

2019, 35(03): 51-57. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.006

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通过测定粗蛋白和其水解后氨基酸的含量，在现行国际氨基酸模式谱的基础上，以氨基酸评分(amino acid score, AAS)、美国国家科学院医学研究所(IOM)模式评分、化学评分(chemical score，CS)、氨基酸比值系数(ratio coefficient，RC)、氨基酸比值系数分(score of RC，SRC)和必需氨基酸指数(essential amino acid index, EAAI)等指标，对香菇(Lentinula edodes)自交选育新菌株243和申香1504及亲本沪香F2子实体的氨基酸特征和蛋白质营养价值进行分析。结果表明，菌株243和申香1504子实体粗蛋白含量显著低于亲本沪香F2，菌株243子实体的氨基酸总量、必需氨基酸总量与沪香F2相当，3个菌株必需氨基酸/总氨基酸值和必需氨基酸/非必需氨基酸值符合FAO/WHO理想蛋白模式；蛋白中AAS评分、IOM评分、CS评分、SRC值、EAAI值均以243菌株最高。3个菌株的蛋白质校正氨基酸计分( protein digestibility corrected amino acids score，PDCAAS)值在0.54~0.61之间，子代243菌株最高，其次为亲本沪香F2。

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不同覆土材料对印度丽蘑子实体生长和营养成分的影响

赵嘉菱, 韦锦范, USMAN Rasheed, 欧小云, 高丽君, 刘斌

2019, 35(03): 58-64. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.007

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分别以田土（LS）、田土∶牛粪（v/v 3∶1，LS+CD）、草木灰（PA）、田土∶沙子（v/v 3∶1，LS+S）为覆土材料栽培印度丽蘑（Calocybe indica），对其农艺性状和营养成分的组成进行测定。结果表明：与其它处理相比，LS+CD处理组产量最高（2078.50 g），出菇密度最大，现蕾天数最短（7.67 d）。LS+CD处理组子的实体粗蛋白含量最高（27.14 g/100 g），粗多糖、脂肪和粗纤维含量较低，必须氨基酸含量最高（10.41%），蛋白质评分结果优于其它处理。研究结果表明栽培时以LS+CD为覆土材料最有利于提高印度丽蘑的产量和营养价值。

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光质对刺芹侧耳子实体生长发育及营养品质的影响

张惠颖, 胡清秀, 邹亚杰, 杜芳, 杨小红, 翟丽梅, 周国英

2019, 35(03): 65-72. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.008

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为探索光质对刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)生长发育及营养品质的影响，将刺芹侧耳菌袋在出菇阶段置于红（A）、黄（B）、绿（C）、蓝（D）、白（E）光下照射，以黑暗条件为对照（CK）。结果表明：黄、绿、蓝、白光照射可缩短刺芹侧耳的生长周期，提高发育整齐程度，且蓝、白光处理的发育整齐度较好；蓝、白光处理的整菇长度（137.8 mm和147.4 mm）和菌柄长度（98.5 mm和107.7 mm）显著短于其它处理；绿、蓝、白光处理的菌柄较粗（最大直径54.8~60.8 mm，最小直径46.3~52.9 mm），但绿、白光处理的菌柄形态不匀称；黄、绿、蓝、白光处理的菌盖最大直径显著大于CK（黑暗）组，其中白光处理的菌盖最大直径最大，且生长后期约25%的菌盖长成畸形，红光和黑暗处理的菌盖多为圆形，形状整齐；蓝光及白光照射使菌盖颜色变黑、变蓝；红光照射的子实体粗蛋白含量为21.97%，显著高于其它处理；红、蓝光照射的子实体中的粗多糖含量低于黄光和黑暗处理。实验结果表明工厂化生产刺芹侧耳时，根据子实体生长状态及时调控光照，将有利于生产出适应于市场需求的产品。〖JP〗

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菌腔虫瘿的季节变化规律及其与暗褐网柄牛肝菌出菇的相关性

何明霞, 杨天伟, 高锋, 刘静, 许欣景, 方艺伟, 王文兵, 张春霞

2019, 35(03): 73-81. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.009

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暗褐网柄牛肝菌（Phlebopus portentosus）是目前唯一能够采用腐生栽培的方法进行菇房人工栽培的牛肝菌类食用菌。在野外，暗褐网柄牛肝菌与蚧虫和植物根系能形成一种特殊的结构：“菌腔虫瘿”，并寄宿在植物根部。通过长期野外跟踪调查，对菌腔虫瘿的季节变化规律及其与暗褐网柄牛肝菌出菇的关系进行初步分析。结果发现，菌腔虫瘿的季节变化规律可划分为两季：雨水季（4~11月）和干旱季（12月~翌年3月）。在雨水季，多数菌腔虫瘿表面光滑、有色泽；虫瘿内部的蚧虫比较活跃，繁殖速度快，腔室内的虫龄结构复杂多样，菌腔虫瘿繁殖、转移和扩散到新根部位的速度较快；在干旱季节，菌腔虫瘿颜色变暗，表面粗糙甚至长霉菌；菌腔虫瘿内部的蚧虫繁殖速度较慢，虫龄结构相对单一，菌腔虫瘿繁殖及转移、扩散速度较慢。暗褐网柄牛肝菌出菇与菌腔虫瘿的变化规律一致，雨水季节暗褐网柄牛肝菌出菇茬数多、产量高，而干旱季节几乎无子实体形成；在4个调查点中，菌腔虫瘿数量与暗褐网柄牛肝菌子实体数量的相关系数分别达到0.874、0.861、0.904、0.815，在一定程度上暗褐网柄牛肝菌子实体数量与菌腔虫瘿数量总体变化趋势一致。

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红缘拟层孔菌子实体提取物的抗炎镇痛解热活性研究

赵秀红, 包海鹰

2019, 35(03): 82-90. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.010

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利用二甲苯致小鼠耳肿胀和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验，研究红缘拟层孔菌(Fomitopsis pinicola)子实体不同提取物的抗炎作用，通过测定小鼠血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）和丙二醛（malondialdehyde, MDA）水平，炎症组织中SOD、MDA、前列腺素E2（prostaglandin E2, PGE2）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα, TNFα）水平探究其抗炎机理；运用醋酸致小鼠扭体和热板致小鼠疼痛方法研究其镇痛作用；利用干酵母致大鼠发热和内毒素致大鼠发热模型探究其解热活性。结果表明，与模型组相比，红缘拟层孔菌子实体极性高的水提物和正丁醇提取物能显著降低腹腔毛细血管通透性、小鼠醋酸扭体和热板疼痛反应、干酵母和内毒素致大鼠发热的体温，其次为甲醇提取物；而二氯甲烷和石油醚提取物可显著抑制二甲苯导致的小鼠耳肿胀，显著升高小鼠血浆和右耳组织液中SOD水平，并显著降低小鼠血清MDA和右耳组织液MDA和PGE2水平，说明红缘拟层孔菌子实体提取物具有抗炎、镇痛和解热作用，且其活性物质主要集中在极性高的水和正丁醇提取物中，其次为甲醇提取物中。

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硼砂吸收滴定法测定香菇中二氧化硫残留量方法的研究

高牡丹, 王德馨, 李静, 鲍连艳

2019, 35(03): 91-96. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.011

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以国标法为基础，建立了一种香菇(Lentinula edodes )二氧化硫残留量检测方法；以饱和硼砂接收液替代乙酸铅接收液，有效消除香菇风味物质中含硫化合物的干扰；方法检测结果相对标准偏差为0.64%~3.26%，精密度良好；与国标方法相比，无显著性差异；说明本方法准确可靠，可以测定香菇中二氧化硫的残留量。

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灰树花水提物抑糖基化物质的分离纯化

詹艺舒, 李婕, 黄琳翔, 蔡志英, 纪鹏伟, 陈炳智, 谢宝贵, 江玉姬

2019, 35(03): 97-104. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.012

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从大孔树脂类型、洗脱剂与上样量等方面确定灰树花中抑糖基化反应化合物的初分离条件，并选取抑糖基活性最高的组分进行薄层层析分析和硅胶柱分离纯化，最后利用高效液相色谱法和傅里叶红外光谱分析化合物。结果表明：采用D101大孔树脂，25 g树脂最佳上样量为2 g，20%乙醇洗脱组分C3的抑糖基化活性最高。用氯仿〖DK1〗∶甲醇(v/v 1〖DK1〗∶9)为洗脱液对C3进行硅胶柱层析纯化，共分离出5个组分C35～C39，其中C38和C39具有比较强的抑糖基化活性,合并C38和C39，再次用氯仿〖DK1〗∶甲醇=(v/v 2〖DK1〗∶8)为洗脱液进行硅胶柱层析纯化，共分离出5个组分G1～G5，薄层层析和HPLC分析分别显示G3为单一斑点和单一峰型，说明G3是一种单体化合物，根据红外光谱结果初步推断该化合物为酚类物质。

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绣球菌酸性多糖的分离纯化、结构鉴定及抗氧化活性研究

杨亚茹, 郝正祺, 常明昌, 孟俊龙, 刘靖宇, 冯翠萍

2019, 35(03): 105-112. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.013

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采用超声波辅助水提醇沉法提取绣球菌(Sparasis crispa)多糖，并通过HZ830大孔树脂、DEAE52纤维素及Sephadex G100凝胶纯化，收集绣球菌多糖SCPⅡ；采用苯酚硫酸法和间羟基联苯法分别测定SCPⅡ中总糖和糖醛酸含量；采用紫外可见光谱、高效凝胶渗透色谱、离子色谱、红外光谱、扫描电镜和原子力显微镜对其结构进行鉴定；通过测定总还原力、清除DPPH、OH和O-2自由基的能力来研究其体外抗氧化活性。结果表明：SCPⅡ的总糖、糖醛酸含量分别为98.7%、17.8%，相对分子质量为5.8×103，单糖组成为半乳糖、葡萄糖、木糖、果糖（摩尔比为2〖DK1〗∶7〖DK1〗∶1〖DK1〗∶2）；其具有一定的清除自由基能力，清除DPPH、OH、O-2自由基的IC50分别为1.64、0.94 mg/mL和7.25 mg/mL。

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赤芝挥发性成分分析及特征指纹图谱构建

关小莺, 黄康艳, 谢意珍, 陈少丹

2019, 35(03): 113-118. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.014

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采用顶空固相微萃取(head space solid phase microextraction，HSSPME)和气相色谱质谱（gas chromatographymass spectrometer，GCMS）技术对15个赤芝（Ganoderma lucidum）子实体样品的挥发性成分进行定性和相对定量分析，并采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，得到15个赤芝子实体的共有特征成分，构建特征指纹图谱。结果表明：15个赤芝子实体样品的挥发性成分存在一定差异；共检测出138种挥发性成分，包括醛酮类19种、萜烯类21种、醇类7种、酯类8种、烷烃类57种、酸类1种、酚及醚类2种、含氧杂环类6种和其它物质17种，其中壬醛、癸醛、十二烷、十三烷、十六烷、柠檬烯、α柏木烯、1,3二叔丁基苯、糠醛等成分含量较高；从15个赤芝子实体样品的指纹图谱中得到29个共有特征成分，构建了赤芝的特征指纹图谱，共标记出29个共有峰。

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增效剂对4种杀虫剂防治异迟眼蕈蚊的增效作用

沈登荣, 李河, 何超, 张睿, 袁盛勇, 张宏瑞

2019, 35(03): 119-124. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.015

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为探讨增效剂对杀虫剂防治异迟眼蕈蚊（Bradysia difformis）的增效作用，采用幼虫浸渍法，以无菌水为对照，测定了95%增效醚（PBO）、96%顺丁烯二酸二乙酯（DEM）、98%磷酸三苯酯（TPP）3种增效剂对4种杀虫剂防治异迟眼蕈蚊2龄、3龄幼虫的增效作用，并测定了3种增效剂对糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）和刺芹侧耳（P. eryngii）菌丝生长的抑制作用。结果表明：3种增效剂对4种杀虫剂均有不同程度的增效作用，其中3种增效剂对溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯的增效作用较强，增效比PBO>TPP>DEM。在2龄、3龄幼虫中，PBO对溴氰菊酯的增效比分别为2.54、3.30；对高效氯氟氰菊酯的增效比分别为3.01、3.21。3种增效剂对吡虫啉、噻虫嗪的增效比在1.02~1.88之间，增效作用较小。3种增效剂对糙皮侧耳和刺芹侧耳菌丝的抑制率较低，〖JP2〗其中PBO对糙皮侧耳和刺芹侧耳菌丝生长的抑制率最强，EC50值分别为207.663 mg/L和165.557 mg/L。〖JP〗3种增效剂可作为拟除虫菊酯类杀虫剂的增效剂应用于食用菌的异迟眼蕈蚊虫害的防治。

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灵芝三萜生物合成及调控研究进展

谭贻, 唐传红, 冯杰, 冯娜, 吴莹莹, 鲍大鹏, 杨焱, 张劲松

2019, 35(03): 125-140. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.016

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灵芝（Ganoderma）是我国传统的药用真菌，具有多种药用功效，其中三萜类化合物是灵芝中主要的药理活性物质之一，深入了解灵芝三萜类化合物的生物合成途径，可促进灵芝分子育种及灵芝三萜规模化制备等工作的开展。本文从灵芝三萜生物合成的甲羟戊酸（MVA）途径、与灵芝三萜生物合成相关的细胞色素P450单加氧酶（CYP450）以及灵芝三萜生物合成的调控因素三方面系统地论述了灵芝三萜合成通路及调控的最新进展，并对今后的研究方向进行了展望，以期为灵芝三萜生物合成与调控的研究工作提供参考。〖JP〗

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香菇采后保鲜技术研究进展

陈冰洁, 乔勇进, 张国强, 董宗宗, 王晓

2019, 35(03): 141-147. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.017

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新鲜香菇（Lentinula edodes）耐贮性差，采后短期内出现萎蔫、褐变等一系列不可逆的生理现象，影响商品价值及食用价值。笔者从贮藏温度的控制、冷杀菌、气调、保鲜剂和涂膜保鲜等方面，概述了香菇保鲜技术的研究进展，并对其发展方向进行展望，以期为香菇的保鲜研究和应用提供参考。

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微生物多样性分析技术应用于食用菌发酵培养料分析的进展

赵妍, 刘顺杰, 张亚茹, 孙育红, 黄建春, 余昌霞, 陈明杰

2019, 35(03): 148-156. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.03.018

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食用菌培养料的腐熟是由多种微生物共同作用而实现的，在这个过程中营养成分降解程度的差异，在一定程度上会影响后期的生产过程及产量。物种多样性差异反映了生态群落的功能和动态变化，因此分析发酵培养料制备过程中微生物多样性的变化对生产优质的培养料，使食用菌获得高产量尤为重要。本文梳理了食用菌发酵培养料微生物多样性分析的研究方法，简述了各种方法的原理并综述了其在相关研究中的应用，最后总结了不同方法的优缺点，以期为未来选用适宜的方法进行研究及开发复合菌制剂提供参考。

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