龙云凤, 吴莹莹, 贾〓薇, 杨海芮, 白〓旭, 张劲松, 杨〓焱, 张赫男, 栾〓军, 高〓玲, 王毅谦, 汪雯翰
利用细胞克隆实验、划痕实验和alamarBlue TM细胞活力测定实验评价樟芝皿培菌丝体醇提物石油醚萃取相和氯仿萃取相对SPCA-1非小细胞肺癌的体外抑制作用,并进一步利用流式细胞术Annexin VFITC(fluorescein isothiocyanate)/PI(propidium iodide)双染测定细胞早期凋亡率、流式细胞术2〖HT《Times New Roman》〗 ′〖HT#〗〖WTB1〗,7〖HT《Times New Roman》〗 ′〖HT#〗〖WTB1〗二氯荧光素二乙酸酯(2〖HT《Times New Roman》〗 ′〖HT#〗〖WTB1〗,7〖HT《Times New Roman》〗 ′〖HT#〗〖WTB1〗dichlorofluorescindiacetate,H2DCFDA)单染测定ROS(reactive oxygen species)释放量、流式细胞术PI单染测定细胞周期变化和ELISA(enzymelinked immunosorbent assay)检测细胞凋亡相关蛋白Caspase3、p53和PARP的表达,探讨樟芝皿培菌丝体醇提物石油醚萃取相和氯仿萃取相抑制SPCA1增殖的作用机理。研究结果表明:樟芝皿培菌丝体醇提物石油醚萃取相和氯仿萃取相均能抑制SPCA1细胞克隆的形成、迁移和增殖,石油醚萃取相的活性明显好于氯仿萃取相;石油醚萃取相通过促进SPCA1释放ROS来诱发线粒体依赖性早期凋亡的发生,并使促凋亡蛋白Caspase3和p53表达上升,同时抑制蛋白PARP表达,从而发挥其抑制SPCA1肺癌细胞增殖的作用;而氯仿萃取相主要通过将SPCA1细胞阻滞在S期抑制其增殖。