食用菌学报

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肖冬来, 马璐, 应正河, 江晓凌, 林衍铨

2016, 23(03): 1-9+79. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.001

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利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)标记结合二维液相色谱串联质谱(two-dimensional liquid chromatography tandem mass spectrometry,2D LC-MS/MS)技术,研究广叶绣球菌(Sparassis latifolia)原基期、幼菇期和成熟子实体阶段的差异表达蛋白质组。采用Q-Exactive质谱鉴定并经ProteinPilot软件搜库,对所获得的差异蛋白进行GO(gene ontology)、KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)和转录因子注释分析。结果共鉴定到可信蛋白2305个,其中2219个蛋白具有相对定量信息。与原基期相比,幼菇期显著上调蛋白104个,下调蛋白142个,子实体阶段显著上调蛋白155个,下调蛋白460个。GO分子功能提示这些差异性蛋白主要参与催化活性、蛋白结合和水解酶活性。KEGG代谢通路分析结果显示,差异蛋白主要涉及碳代谢、氨基酸合成、核糖体、糖酵解/糖衍生等代谢过程。差异蛋白中与信号传导和转录因子相关的蛋白数量分别为27个和7个。

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金针菇异戊烯基焦磷酸异构酶基因的克隆及表达分析

刘建雨, 刘建辉, 徐珍, 于海龙, 宋春艳, 尚晓冬

2016, 23(03): 10-14. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.002

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PCR扩增了金针菇(Flammulina velutipes)异戊烯基焦磷酸异构酶基因(FvIDI)的DNA全长和开放阅读框序列。该基因的ORF全长753bp,DNA全长923bp,含有3个内含子和4个外显子,编码250个氨基酸,金针菇异戊烯基焦磷酸异构酶相对分子质量为28450,等电点为5.05。采用实时荧光定量PCR技术研究FvIDI基因在不同发育时期和不同温度下的表达量,结果显示,FvIDI基因在采收期菌盖中表达量最高,4℃诱导处理2~4h和37℃诱导处理2~6h的表达量明显高于常规温度21℃处理。

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桦褐孔菌实时荧光定量PCR内参基因的筛选

安丹丹, 李健, 隋飞飞, 曲柏宏, 陈艳秋, 张宇婷

2016, 23(03): 15-24. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.003

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笔者采用软件GeNorm分析7个内参基因在桦褐孔菌(Inonotus obliquus)中表达的稳定性。结果表明,在不同pH培养基处理下,最适内参基因数为2,act和gapdh为最适内参基因;高温刺激下,最适内参基因数为2,act和gapdh为适宜内参基因;在菌核发育阶段,最适内参基因数为2,gapdh和cyp为最适内参基因;在菌丝体发育阶段,最适内参基因数为3,act,tub和ubq为适宜内参基因;在整体试验样本中,最适内参基因数为2,act和gapdh为最稳定的内参基因。

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南方灵芝中一种新型免疫调节蛋白的生物信息学分析

王莹, 高英女, 汪滢, 李燕, 唐利华, 白睿, 鲍大鹏

2016, 23(03): 25-29+79. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.004

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利用生物信息学方法从蛋白质基本理化特性、信号肽和亚细胞定位、分子进化与翻译后修饰位点以及蛋白质三维结构等方面,对南方灵芝(Ganoderma australe)中免疫调节蛋白c13717进行预测分析,并将c13717蛋白的分析结果与三种典型的真菌免疫调节蛋白(LZ-8、Fip-fve和Fip-vvo)以及牛樟芝(Antrodia camphorata)中免疫调节蛋白ACA进行比较分析。结果发现,c13717蛋白相对分子质量为14150,N端具有信号肽,亚细胞定位于细胞外,遗传进化与ACA相近,而与LZ-8、Fip-fve和Fip-vvo较远,翻译后修饰位点较少,蛋白三维结构含有cerato-platanin(CP)结构域,不具有真菌免疫调节蛋白典型的FNIII结构,证明c13717蛋白不属于真菌免疫调节蛋白(fungal immunomodulatory protein,FIP)家族,而属于CP蛋白家族,可能具有独特的生物活性。

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肺形侧耳交配型研究

李维焕, 吴璇, 王建彬, 冯路瑶, 陈蒙蒙, 程显好

2016, 23(03): 30-32. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.005

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以肺形侧耳(Pleurotus pulmonarius)鲁大秀珍1号(LD1)的新鲜子实体为材料,收集担孢子并分离获得58株单核菌株,经过三轮交配实验,将58株单核菌株分成4组(T_1、T_2、T_3和T_4),分别有16、14、12和16株,可知肺形侧耳属于四极性异宗配合;指定T_1为A_1B_1,T_2为A_2B_2,核迁移实验明确了T_3的交配型为A_1B_2,T_4为A_2B_1;卡方检验结果表明,4种交配型单核体的比例符合1:1:1:1的分离规律。

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草菇生物学特性与农艺性状相关性分析

严俊杰, 王瑞清, 廖伟, 吴小婷, 江玉姬, 谢宝贵

2016, 23(03): 33-38. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.006

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观察记录了36株可正常结实草菇(Volvariella volvacea)的厚垣孢子出现时间、菌落形态、菌丝长势以及菌丝细胞核个数等特性,并应用SPSS生物统计软件将其与出菇时的9个农艺性状进行相关性分析。结果表明:菌落形态与高稳系数呈显著正相关;菌丝长势与现原基时间呈显著负相关,与高稳系数和菇体颜色呈显著正相关;菌丝的细胞核个数与子实体破膜时间呈显著正相关。

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工厂化刺芹侧耳菌渣栽培香菇的多菌株差异

张文升, 蒋俊, 赵妍, 郑巧平, 章炉军, 于海龙, 尚晓冬, 刘建辉, 宋春艳, 谭琦

2016, 23(03): 39-42. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.007

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以4个香菇菌株(Lentinula edodes)申香16号、申香18号、申香215和L808为研究对象,以常规木屑麸皮培养料(79%木屑,20%麸皮,1%石膏)为对照,采用工厂化生产刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)采收一潮菇后的菌渣不同比例替代木屑和麸皮进行栽培,比较栽培效果。结果表明:相对于对照培养料,申香18号在菌渣培养料A(69%木屑,20%刺芹侧耳菌渣,10%麸皮,1%石膏)和B(59%木屑,30%刺芹侧耳菌渣,10%麸皮,1%石膏)上的单菇重显著下降,菌柄长度和直径均变小,菇型改善,棒产量也显著增加;申香16号在A、B配方培养料上较对照培养料虽产量显著增加,但菇柄变长,菇型变差;菌株L808在B配方培养料上较对照培养料菌盖直径和单菇重显著下降;而申香215在培养料A、B上的各考察性状均与对照培养料无明显差异。

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三种因素对“沪农灵芝1号”子实体三萜的影响

刘艳芳, 吕佳维, 冯娜, 张劲松, 王晨光, 杨焱, 张忠, 吴迪, 周帅, 唐传红, 唐庆九

2016, 23(03): 43-48. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.008

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以8种灵芝三萜标准品为对照,考察栽培生境、栽培方式、采收时期三种因素对我国灵芝主栽品种"沪农灵芝1号"子实体中三萜含量和指纹图谱的影响。结果表明,三种因素对灵芝子实体中的三萜含量具有显著影响,福建栽培所得灵芝子实体中三萜含量较高,代料栽培子实体三萜含量显著高于段木栽培,成熟期灵芝子实体的三萜含量较高;随着孢子粉采收时间的延长,子实体中三萜含量逐渐降低,但是各因素对灵芝子实体中三萜指纹图谱信息无显著影响,相似度均在0.93以上。

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山茶靛牛肝菌子实体提取物的体外抗肿瘤活性

曾凡清, 冯娜, 郑巧平, 张劲松, 刘德云

2016, 23(03): 49-52. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.009

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依次用95%乙醇和蒸馏水提取山茶靛牛肝菌(Boletus pseudoregius)子实体,再用不同有机溶剂萃取95%乙醇提取物,考察山茶靛牛肝菌子实体不同有机溶剂萃取物和水提物的体外抗肿瘤活性。结果表明:石油醚萃取物对白血病细胞K562抑制作用较弱,对人肠癌细胞SW620和人肝肿瘤细胞HepG-2的增殖有较强的抑制作用,IC50分别为95.7和195.4μg/mL;正丁醇萃取物对K562、SW620和HepG-2的增殖都有较强的抑制作用,IC50分别为24.2、89.0和59.6μg/mL;石油醚和正丁醇萃取物在实验浓度范围内对人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1的增殖无抑制作用;氯仿和乙酸乙酯萃取物对K562、SW620和HepG-2肿瘤细胞和WPMY-1正常细胞的增殖均有较强抑制作用,其中氯仿萃取物的抑制作用最强;水提物对以上3种肿瘤细胞抑制作用不明显,对正常细胞的增殖无抑制作用。

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尖顶羊肚菌多糖的超声波辅助提取工艺优化及其对肝损伤小鼠抗氧化活性的影响

毕博, 于荣利

2016, 23(03): 53-56. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.010

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采用正交试验优化超声波辅助提取尖顶羊肚菌(Morchella conica)多糖工艺,并分析多糖对肝损伤小鼠体内抗氧化活性。结果表明,在超声功率600 W、提取温度60℃、提取时间80min、醇沉浓度70%、料液比1:40(g:mL)的条件下,多糖得率为(2.25±0.04)%。影响多糖得率的因素由大到小依次为超声功率、提取温度、料液比、乙醇浓度和提取时间。与CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤模型组相比,灌胃尖顶羊肚菌多糖处理组的肝组织中丙二醛含量显著降低、总抗氧化能力显著提高;血清中丙二醛含量显著降低、超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力显著增加。

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赤芝子实体乙酸乙酯提取物的化学成分研究

王樟根, 陈少丹, 苏冀彦, 谢意珍, 桂蜀华

2016, 23(03): 57-60. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.011

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用乙酸乙酯对赤芝(Ganoderma lucidum)子实体进行提取,并采用多种柱层析方法分离得到10个化合物,经质谱和核磁共振方法鉴定这10个化合物分别为拱状灵芝素A(1)、拱状灵芝素B(2)、对苯二甲酸正丁异丁二醇酯(3)、对苯二甲酸二丁酯(4)、α-羟基-24-烷酸(5)、棕榈酸(6)、硬脂酸(7)、N-苯乙基-苯甲酰胺(8)、原儿茶酸(9)和琥珀酸(10),其中化合物3、4、8、9和10是首次从赤芝子实体中分离得到的。

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蛹虫草固体发酵生产虫草素的条件优化

吐尔尼散·吐地, 张忠, 唐庆九, 周帅, 刘艳芳

2016, 23(03): 61-66. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.012

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用直径6cm,高10cm聚乙烯培养罐固体发酵蛹虫草(Cordyceps militaris),以固体发酵产物中虫草素含量为指标,从16个蛹虫草菌株中筛选出虫草素含量最高的菌株,考察固体发酵该菌株的培养基组成、培养时间、培养基装量、料液比、培养温度、接种量和添加物对虫草素含量的影响,得到了有利于蛹虫草固体发酵产虫草素的培养条件:培养罐装20g小麦,按小麦干重6%的量分别加入玉米粉和黄豆粉,按料液比1:1.4(w:v,以小麦干重为基准)加入营养液(g/L:2.0K_2HPO_4·3H_2O,0.5 MgSO_4·7H_2O,16甘氨酸),培养温度为26℃,时间46d,接种量10%。

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樟芝发酵液和液体发酵菌丝体提取物对SPCA-1细胞的体外抑制作用

杨海芮, 汪雯翰, 贾薇, 张劲松, 张赫男, 杨焱, 樊华, 刘志东, 张亚平, 孙文博

2016, 23(03): 67-71. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.013

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樟芝(Taiwanofungus camphoratus)发酵液和经95%乙醇浸提后的菌丝体醇提物分别用石油醚和氯仿进行分级提取,得到石油醚和氯仿提取物。对不同提取物进行体外抑制SPCA-1肺癌细胞增殖实验,发现各提取物均可抑制SPCA-1细胞的增殖,其中发酵液石油醚提取物抑制作用最好,IC50为62.5μg/mL,发酵液和菌丝体氯仿提取物的抑制作用较好,IC50分别为120.9和109.5μg/mL,菌丝体石油醚提取物的抑制作用较差,在25~150μg/mL作用浓度下,抑制率低于20%。各提取物对SPCA-1细胞凋亡和生长周期作用的测定结果表明,各提取物在肺癌细胞SPCA-1中通过诱导细胞凋亡及S期周期阻滞来表现其抑制作用。

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灵芝菌丝体及发酵液中三萜化合物的研究进展

张容容, 陈慧, 刘高强, 王晓玲

2016, 23(03): 72-78. https://doi.org/10.16488/j.cnki.1005-9873.2016.03.014

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三萜类化合物是灵芝(Ganoderma lucidum)的关键药效成分之一。笔者综述灵芝菌丝体及发酵液中三萜化合物的主要组分、深层发酵技术和合成关键酶、抗肿瘤作用及其构效关系。

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